多功能净化柱-液相色谱法测定奶粉中黄曲霉毒素含量

奶粉中黄曲霉毒素应用案例

样品提取：

Ÿ 称取4g样品（固体样品需粉碎，并过1mm分样筛），加入16mL超纯水复原，

Ÿ 取4g复原液，加入10mL提取液（纯乙腈）混匀；

Ÿ 涡旋6min，放入离心机（8000r/min离心20min），取上清液作为样品提取液

样品净化：

Ÿ 步骤1：向试管中加入5mL样品提取液

Ÿ 步骤2：将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端

Ÿ 步骤3：将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中

Ÿ 步骤4：取2mL净化提取液，氮吹至干，用1mL或0.5mL初始流动相复溶，过微孔滤膜，上机分析

HPLC检测条件：

Ÿ 流动相：A相，水；B相，乙腈-甲醇（50:50，v:v）

Ÿ 等梯度洗脱条件：A，70%；B，30%

Ÿ 色谱柱：C18柱（柱长250mm，柱内径4.6mm，填料粒径5μm）

Ÿ 流速：1.0mL/min

Ÿ 柱温：40℃

Ÿ 进样量：50μL

Ÿ 荧光检测：激发波长：360nm；发射波长：430nm 

实验结果：

黄曲霉毒素AFM1液相色谱图

(AFM1浓度为5ng/mL）

奶粉空白样品液相色谱图

奶粉加标样品液相色谱图

（AFM1加标浓度为31.25ng/g）

奶粉样品加标回收率

(AFM1加标浓度为31.25ng/g)