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多功能净化柱-液相色谱法测定酸奶中黄曲霉毒素含量
  • 多功能净化柱-液相色谱法测定酸奶中黄曲霉毒素含量
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    酸奶中黄曲霉毒素应用案例

     

    样品提取:

    Ÿ 称取4g酸奶样品于50mL离心管中,加入10mL提取液(纯乙腈)混匀

    Ÿ 涡旋6min放入离心机(8000r/min离心10min),取上清液作为样品提取液

    样品净化:

    Ÿ 步骤1:向试管中加入5mL样品提取液

    Ÿ 步骤2:将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端

    Ÿ 步骤3:将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中

    Ÿ 步骤42mL净化提取液,氮吹至干,用1mL0.5mL初始流动相复溶,过微孔滤膜,上机分析

    图片1.png 

     

    HPLC检测条件:

    Ÿ 流动相:A相,水;B相,乙腈-甲醇(50:50v:v

    Ÿ 等梯度洗脱条件:A68%B32%

    Ÿ 色谱柱:C18柱(柱长150mm,柱内径4.6mm,填料粒径5μm

    Ÿ 流速:1.0mL/min

    Ÿ 柱温:40

    Ÿ 进样量:50μL

    Ÿ 荧光检测:激发波长:360nm;发射波长:440nm 


    实验结果:

    1550819836113639.png 

    黄曲霉毒素标液相色谱图

    (AFM15ng/mL

     

     

     1550819845656443.png

    酸奶阴性样品与阴性加标样品对比图

    (AFM1加标浓度为10ng/g)

     

     

     

    酸奶样品最低检出限、加标回收率与重复性

    (AFM1加标浓度为10ng/g)

    黄曲霉毒素

    最低检出限(ng/g

    回收率(%

    重复性RSDn=3,%

    AFM1

    0.04

    118.3

    2.14

     




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