面粉中赭曲霉毒素应用案例
样品提取:
称取5g面粉样品于50mL离心管中,加入20ml提取液(84%乙腈-水溶液)混匀
超声提取30min,放入离心机(8000r/min离心20min),取上清液作为样品提取液
样品净化:
步骤1:向试管中加入5mL样品提取液
步骤2:将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端
步骤3:将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中
步骤4:取2mL净化提取液,氮吹至干,用0.4mL初始流动相复溶,过微孔滤膜,上机分析
HPLC检测条件:
流动相:乙腈-水-冰乙酸(96+102+2)
色谱柱:C18柱(柱长250mm,柱内径4.6mm,填料粒径5μm)
流速:1.0mL/min
柱温:35℃
进样量:50μL
检测波长:激发波长333nm,发射波长460nm
实验结果:
OTA |
赭曲霉毒素液相色谱图
(赭曲霉毒素浓度为20.0ng/mL)
OTA |
面粉样品与面粉加标样品对比图
(赭曲霉毒素浓度为16.0ng/g)
面粉样品最低检出限、加标回收率与重复性
(赭曲霉毒素浓度16.0ng/g)
赭曲霉毒素 | 最低检出限(ng/g) | 回收率(%) | 重复性RSD(n=3,%) |
OTA | 0.07 | 85.8 | 3.25 |