贞正®223多功能净化柱可实现检测黄曲霉毒素(M族),配合LC-MS/MS或HPLC检测仪器,定量准确。
样品种类 | 样品复原 | 样品质量 | 提取液 | 提取方法 |
牛奶等液体制品 | / | 4g | 10mL 纯乙腈 | 涡旋6min,放入离心机(≥ 7000r/min离心20min),取上清液作为样品提取液
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奶粉等粉末样品 | 称取4g样品(固体样品需粉碎,并过1mm分样筛),加入16mL超纯水复原 | 4g复原液 |
样品净化:
步骤1:向试管中加入5mL样品提取液
步骤2:将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端
步骤3:将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中
步骤4:取2mL净化提取液,氮吹至干,用1mL或0.5mL初始流动相复溶,过微孔滤膜,上机分析
多功能净化柱使用流程图
结果计算:
复溶体积(mL) | 标曲计算浓度(c, ng/mL) | 牛奶等液体制品中含量(X,μg/kg) | 奶粉等粉末样品中含量(X,μg/kg) |
1 | c1 | X=1.25c1 | X=6.25c1 |
0.5 | c2 | X=0.625c1 | X=3.125c2 |
HPLC检测条件
流动相:A相,水;B相,乙腈-甲醇(50:50,v:v);等梯度洗脱条件:A,70%;B,30%
色谱柱:C18柱(柱长250mm,柱内径4.6mm,填料粒径5μm)
荧光检测:激发波长:360nm;发射波长:430nm
流速:1.0mL/min;柱温:40°C;进样量:50μL
黄曲霉毒素混标液相色谱图
(AFM1和M2浓度为2ng/mL)
牛奶阴性加标样品液相色谱图
(AFM1和M2加标浓度为2.5ng/g)
牛奶质控样品回收率与重复性
(AFM1和M2加标浓度为2.5ng/g)
黄曲霉毒素 | 回收率(%) | 重复性RSD(n=3,%) |
AFM2 | 91.51 | 1.70 |
AFM1 | 94.11 | 1.95 |