免疫亲和层析产生背景及技术原理

  您知道免疫亲和层析产生背景及技术原理吗？下面由贞正固相微萃取来介绍一下。

  免疫亲和层析产生背景
  残留检测的确证方法主要是仪器分析法,如LC-MS、GC-MS或HPLC,这些方法中因残留组分量很小,检测方法需要较高灵敏度和准确性。样品前处理是检测技术的核心,传统的样品净化技术主要有液—液分配(LLE)、固相萃取(SPE)、基质固相分散(MSPD)、超临界萃取(SFE)等。但是这些净化技术通常需要多个净化步骤,缺乏选择性,不但费时繁琐、容易污染、损失样本且会引起严重的本底干扰,降低结果的可靠性。因此建立高效的样本净化技术已成为痕量分析的主要问题。近20年,固相提取领域研究的不断深入,推进了从分析物中选择性萃取目标产物为目的的新技术发展。
  免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC)提供了一个有效的方法,从液体材料中进行选择净化、化合物浓缩、分类,然后从固相支持物中提取纯化样本。20世纪60年代末溴化氰活化琼脂糖载体开始,IAC成为免疫化学中有效分离手段之一。

  Van等首次应用IAC技术净化了猪肉中的氯霉素随后1989年又在此技术基础上测定了蛋、牛奶中的氯霉素。其现在已成为医药、兽药、食品检测中,前处理方法应用的重要手段。
  这项技术在兽药残留中的应用特别广泛,包括猪肉中的磺胺类、血浆中克仑特罗、血清中二恶英等。生物样本中爱比菌素应用免疫亲和层析的回收率也可达到80%～86%。
  免疫亲和层析技术原理
  IAC也是色谱技术的一种,可称为免疫色谱技术,是一种利用抗原抗体特异性可逆结合特性的SPE技术,根据抗原抗体的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将抗体与惰性微珠共价结合,然后装柱,将抗原溶液过免疫亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原,用适当的缓冲液和合适的保存方法,柱可以再生备用。其提纯效率很高,通常只需一次就可达到1000～10000倍的纯化效果。