固相微萃取探针原位拉曼光谱用于不饱和脂质的分析

加拿大滑铁卢大学JanuszPawliszyn等在AnalyticalChemistry上面发表了题为“ProfilingofUnsaturatedLipidsbyRamanSpectroscopyDirectlyonSolid-PhaseMicroextractionProbes”文章。在这项工作中，作者提出了拉曼光谱检测和固相微提取（SPME）探针技术直接结合，原位检测不饱和脂质。

脂质分离技术和质谱分析技术的发展促进了脂质分析.脂质组学研究。但色谱.质谱分析通常需要昂贵的仪器和耗材，并需要高质量的分析师来操作。光谱学检测很便宜.快捷易操作，吸收光谱.荧光光谱等常用于生物样本分析。然而，使用这些光谱分析脂质通常需要衍生分析来引入生色团或荧光团，巨大的衍生基团可能会扭曲分析结果。拉曼光谱不需要衍生，利用分子本身的振动吸收进行分析。但拉曼光谱灵敏度较低，因此需要对样品进行预处理，对物体进行分离.富集。固相微萃取（SPME）该技术可以同时发挥分离富集的作用，种样品分析(如食品).环境样品等。因此将SPME探针与拉曼光谱的结合可以分析多种样品基质中的多种物质。在这项工作中，作者用包埋聚丙烯腈（PAN）的.C18微粒包被的SPME探针提取脂质，然后用拉曼光谱进行原位分析，实现SPME探针上的脂质原位拉曼光谱分析。

作者首先选择SPME包装材料用于鱼肝油DHA和EPA分析优化提取过程。C18.C8/SCX混合型与HLB三种SPME包被材料中，HLB1608/1630和1600/16100cm-一种特征吸收，与不饱和脂肪酸的特征吸收重叠，所以作者选择了C18-PAN包被的SPME探针。在优化清洗溶剂时，作者发现使用水基溶剂清洗（如水甲醇或水丙酮）对脂质的影响较小，而异辛烷的影响较大，因此使用水基溶剂进行清洗。作者发现提取温度对提取效率影响不大，但温度较高RSD因此，z终选择25℃提取过程15分钟即可达到平衡，因此提取时间为15分钟。

SPME探针上吸附的不饱和脂肪酸呈1445cm-1处的CH2伸缩振动.1265cm-1处的C-H面内伸缩振动.1655cm-1处的C=C以脂肪酸酯形式存在时，会有1720-1750cm-1峰。作者发现165555。cm-1处吸收不与其他吸收峰重叠，因此适合定量分析；165555cm-1与1445cm-光谱强度的比值可用于确定脂质的不饱和度，其线性程度较好（R2=0.952）。

作为验证实例，作者用这种分析方法分析了不同种类的植物油，并添加了植物油Omega-3或Omega-6脂肪酸膳食补充剂。分析结果表明，样品的成分比较复杂。尽管作者认为，尽管如此，SPME已广泛应用于定量质谱分析，但拉曼光谱的定量方法仍需研究。

综上所述，作者提出了一个SPME探针与拉曼光谱直接结合，以低成本分析各种基质中不饱和脂质的方法，提供了与拉曼光谱相比的方法LC-MS/MS试样损伤z小的一种.快速原位分析甚至活体分析的替代方法。